你们好，最近小活发现有诸多的小伙伴们对于流式细胞术结果分析，流式细胞术这个问题都颇为感兴趣的，今天小活为大家梳理了下，一起往下看看吧。
1、 流式细胞术实验步骤？
2、 I流式细胞术细胞膜分子的检测
3、 1.细胞重悬：细胞处理计数后，用细胞洗液(含2% BSA的PBS)重悬细胞，使细胞浓度为1107/mL；
4、 2.对照设置：空白对照、同型对照，从待测样品的每管中取上述重悬细胞100微升，使每管细胞数达到1106个/管；
5、 3.第一抗体的孵育：空白对照管中不加抗体，在同型对照管和待测样品管中分别加入5-20uL同型抗体和靶抗体(具体用法见说明书)，充分混合后在4孵育30分钟或在冬季室温下孵育。
6、 孵育过程中，每隔10分钟摇动反应管，使细胞和抗体充分反应。
7、 4.细胞清洗：加入适量细胞洗液，1000rpm离心5分钟，弃去上清液，反复洗涤2次；
8、 5.细胞重悬：用100L细胞洗液重悬细胞；
9、 6.二抗孵育：在同型对照管和待测管中分别加入适量荧光标记的二抗，充分混合。4或冬季室温孵育30分钟，每隔10分钟摇动反应管；
10、 7.细胞清洗：加入适量细胞洗涤液，1000rpm离心5分钟，弃去上清液，反复洗涤2次；
11、 8.在机检测：用100-200L细胞洗液重悬细胞，先测量空白管和同类型对照管，再测量待测管。
12、 2.检测从010到31001的细胞质分子
13、 1.细胞的制备：细胞处理计数后，1000rpm离心5min，弃去上清液，用细胞洗液(含2% BSA的PBS)洗涤细胞一次；
14、 2.细胞固定：用4%多聚甲醛固定细胞，比例为每2106个细胞加入1ml 4%多聚甲醛，室温固定10 ~ 15min；
15、 3.细胞清洗：加入细胞洗涤液，1000rpm离心5min，弃去上清液，重复清洗一次；
16、 4.细胞破膜：用破膜器重悬细胞，加入1.5mL EP管，1*106/管，体积100L/管；
17、 5.对照设置：空白对照、同型对照，从待测样品的每管中取上述重悬细胞100微升，使每管细胞数达到1106个/管；
18、 6.一抗孵育：空白对照管不加抗体，同型对照管和待测管分别加入5-20uL同型抗体和靶抗体(具体用法见说明书)，充分混合，在4孵育30分钟或冬季室温孵育。
19、 孵育过程中，每隔10分钟摇动反应管，使细胞和抗体充分反应。
20、 7.细胞清洗：加入适量穿膜剂，1000转/分钟离心5min，弃去上清液，洗涤细胞两次；
21、 8.细胞重悬：用100微升穿膜剂重悬细胞；
22、 9.二抗孵育：在同型对照管和待测管中分别加入适量荧光标记的二抗，充分混合。4或冬季室温孵育30分钟，每隔10分钟摇动反应管；
23、 10.细胞清洗：加入适量穿膜剂，1000rpm离心5min，弃去上清液，洗涤细胞两次；
24、 11.上机检测：用100-200uL穿膜剂重悬细胞，先测量空白管和同类型对照管，再测量待测管。
以上就是流式细胞术这篇文章的一些介绍，希望对大家有所帮助。
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